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人Ⅰ型膠原交聯C末端肽(ICTP)elisa試劑盒操作步驟

更新時間:2017-05-13      瀏覽次數:1353

人Ⅰ型膠原交聯C末端肽(ICTP)elisa試劑盒基本信息

膠原蛋白是大分子蛋白質,其分子量在30萬以上,并不能被人體直接吸收。食入含膠原蛋白的食物必須經消化道蛋白酶分解成單純的小分子氨基酸,才能被腸道吸收利用,再經過機體復雜的生物化學反應,合成人體需要的膠原蛋白,供給各組織器官的需要。由二個或二個以上氨基酸組成--蛋白肽。人體的吸收是以肽的方式進行,食用蛋白肽的吸收利用率可達100%。肽的分子量、氨基酸排列順序不同所表現的功能就不同。膠原蛋白富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸。膠原蛋白是細胞外基質中zui重要的組成部分。膠原蛋白肽是一種細胞外蛋白質,它是曲3條肽鏈擰成螺旋形的纖維狀蛋白質,膠原蛋白是人體內含量zui豐富的蛋白質,占全身總蛋白質的1/3。一個60kg的成年人的身體內約有3公斤膠原蛋白,主要存在于人體皮膚、骨骼、眼睛、牙齒、肌腱、內臟(包括心、胃、腸、血管)等部位,其功能是維持皮膚和組織器官的形態和結構,也是修復各損傷組織的重要原料物質。在人體皮膚成分中,有70%是由膠原蛋白所組成。

人Ⅰ型膠原交聯C末端肽(ICTP)elisa試劑盒操作步驟

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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